设为首页 加入收藏
  精选图片
  精彩视频
为什么哈工大哈尔滨校区的高
JustinBieber为何放弃SelenaGomez最
冲上南京大学好还是保底上同
什么是古典型前腰谁提出了这
中国矿业大学孙越崎学院建议
dota2打的挺多的但分数上不去
傻瓜相机和拍立得相机更推荐
为何周天子自己不掌握军队而
为什么喜欢奥迪
为什么没人说古人抄袭
  国际  
为什么今日头条在AppStor 
合肥工业大学长安大学安 
亲戚要开淘宝店卖东北特 
QQ音乐这种产品是如何解决 
2018年齐亮相的国产奥迪 
前端对AST抽象语法树的应 
你最爱的门将是谁_2 
当前位置:主页 > 国际 >

为什么细胞要慢冻速融

2020-02-26 17:56:48

慢冻主要还是防止细胞内形成大的冰晶,破坏细胞器、细胞膜等细胞结构,因为目前我们还无法处理这些细胞损伤问题。我们所说的冰晶是由水分形成的,主要还是解决细胞内冰晶问题。至于你所说的细胞外结晶的问题,你以为所谓的冻存是在大量含水的环境中快速进行的吗?再一个细胞是有失水情况,影响肯定是有影响的,比如延缓细胞代谢活动,这也是我们希望看到的,细胞的失水也是在一定范围的(比如你要是口渴缺水对你有什么影响)。细胞冻存融化的原则是缓冻速融细胞冻存(慢)1.预先配制冻存液:10%DMSO+90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷;2.用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和);3.将预冷的冻存液悬浮细胞,用滴管轻轻吹打混匀.4.在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期.5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)最好;或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐.细胞冻存管融化(快)1.将细胞冻存管取出,浸入37℃水浴锅内,轻轻晃动,注意融化,当融得只剩一个小冰块时,将细胞插入冰中.2.加入4℃预冷的培养基,用手指轻弹悬浮细胞团.3.250g离心10min,去除上清液,再加入培养基,轻轻悬浮.4.尽量将细胞中的DMSO洗去,计数.在细胞冻存过程中,所结的冰晶对细胞伤害较大,所以过程一定要慢,DMSO能减少冰晶伤害.在细胞复苏过程中,要快,以减少融化对细胞的伤害,其实还是冰晶的问题.DMSO浸润的细胞非常脆弱,所以可要尽快将DMSO去除,一定要轻.

上一篇:为什么日本的地铁站出口要标注海拔
下一篇:为何阿兰图灵因为自己的同性倾向而被迫害而同时期的维特根斯坦则没有